第１９回「ES細胞の培養」

1. 

   「バイ博士、ES細胞を培養したいのですが、他の細胞と違う点は何ですか？？」

2. 

   「一番違うのは、未分化な状態を保持しながら増殖させなければならない点だね。」

3. 

   「具体的には、どうするのですか？」

4. 

   「まず、ES細胞を未分化な状態で維持させるための因子であるLIF(*1)を添加することと、フィーダー細胞上に播種することが必要だね。」

5. 

   「フィーダー細胞には、どのような細胞が用いられますか？」

6. 

   「フィーダー細胞は、マイトマイシンＣやγ線照射などによって増殖を抑えた細胞が用いられるんだ。マウスの胎児から初代培養した繊維芽細胞をマイトマイシンCで処理するのが多いようだが、STOや3T3などの株細胞をマイトマイシンCで処理することも可能だよ。」

7. 

   「あと、気を付けることはありますか？」

8. 

   「ES細胞は代謝活性が高いようで、すぐに培養液が黄色くなるので毎日培地交換することが必要だね。あと、３日以上連続培養すると分化能が悪くなったりするので３日おきに継代する必要もあるね。」

9. 

   「結構手間がかかるのですね。」

10. 

    「そうなんだ。でも、手間をかけて根気よく育ててあげれば、分化誘導した際に、うまく分化してくれるんだよ。」

11. 

    「私も、バイ博士に根気よく指導していただいているので、いつかは立派に分化しますね。」

12. 

    分化能は既に失われていると思うけど・・・と思いながら
    「期待しているよ。」

13. 皆さんもフィーダーの準備など煩雑な操作が多いでしょうが、その努力が良い結果を生みます。
    頑張りましょう！！（2014年当時の知見を元に作成しました。）
    *1）Leukocyte　Inhibitory　Factorの略。