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知っておきたい 細胞培養の基礎を学ぼう!

細胞培養基礎講座は、 培養の第一人者バイ博士のもとに弟子入りした陽助手が、 日々の細胞培養に関する疑問を博士から教わります。

第24回「浮遊細胞って?」

  1. 「次は浮遊細胞を培養してみたいのですが、浮遊細胞とはどのような細胞ですか?」

  2. 「浮遊細胞とは培地中で浮いた状態で増殖する培養細胞のことだよ。例えば自分の体の中で浮いている細胞を考えてごらん?」

  3. 「浮いている…血液の中に含まれる血球細胞などでしょうか?」

  4. 「そうだね、血球由来の細胞株だとTHP-1やHL-60などの細胞がよく知られているね。ちょうど私が培養している細胞があるから、分けてあげるよ。」

  5. 「ありがとうございます!浮遊細胞は特別な継代方法があるのですか?」

  6. 「トリプシンで細胞を剥離する必要もないから、接着細胞より単純だよ。」

  7. 「細胞の剥離が必要ないんですね!トリプシンで放置しすぎる心配もなくて安心です!」

  8. 「(以前の講座でも説明したのに、この前もトリプシン処理をしすぎていたな…。)凝集塊ができ始めたら継代のタイミングだね。まず、培地ごと細胞を回収して、細胞をよく解してから遠心するんだ。」

  9. 「あれ?接着細胞は細胞を回収する前の培養上清を除去する際に死細胞を取り除けますが、浮遊細胞はどうやって死細胞を取り除けばいいんですか?」

  10. 「死細胞は軽くなるため、遠心した際に上清側に来るんだよ。遠心後に上清を捨てるから、その際に除去できているんだ。」

  11. 「接着細胞と浮遊細胞では死細胞を除去するタイミングが違うんですね。」

  12. 「上清を捨てた後に、新しい培地でピペッティングを行い、細胞浮遊液を調製したら、細胞濃度を算出し、各細胞株に適した細胞濃度で播種するんだ。細胞を回収してからは接着細胞と同じ操作だね。細胞濃度を算出するのに、慣れるまでは血球計算盤を用いて生細胞数を数えるといいよ。」

  13. 「わかりました!ちなみに培養器具選びで気を付ける事はありますか」

  14. 「接着コーティングされていないものだったらOKだよ。接着コーティングされていると浮遊細胞でも接着してしまうから気を付けてね。」

  15. 「わかりました。準備しておきます!」

  16. 「(浮遊細胞のようにふわふわせず、地に足をつけてほしいものだが…)」

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