細胞.jp｜細胞培養基礎講座「E・H？」

細胞培養基礎講座は、培養の第一人者バイ博士のもとに弟子入りした陽助手が、日々の細胞培養に関する疑問を博士から教わります。

「E・H？」

「博士、このカタログに載っているE・Hってなんですか？」

	「いいエッチだと。何を聞くんだ！変なカタログを見るんじゃない！」

「博士、勘違いしないでください。私は、培地のカタログにMEM-EとかHとか記載があるのがどんな意味かをお聞きしたのですが…」

	「イヤーごめんごめん。君の日頃の言動からつい…。（赤面するバイ博士） MEM培地などのEは、バッファー系がEarle（アール）ベースのもので、５％炭酸ガス下で平衡するように設定されている培地なんだ。HはバッファーがHanksベースのもので、通常の大気で平衡になるように設定されているんだ。」

「イヤーごめんごめん。
君の日頃の言動からつい…。（赤面するバイ博士）
MEM培地などのEは、バッファー系がEarle（アール）ベースのもので、５％炭酸ガス下で平衡するように設定されている培地なんだ。HはバッファーがHanksベースのもので、通常の大気で平衡になるように設定されているんだ。」

「この２つはどのように使い分けるのですか？」

	「インキュベータの性能により使い分けるのが基本だが、ｐＨの変化に弱い細胞例えば正常２倍体の細胞などは、継代時にHanksベースのものを使用すると生着率がよくなるし、植え込み細胞数が少ない場合や増殖が遅い細胞などに使用すると、良いようだね。」

「じゃーHanksベースのMEMを使用すれば、炭酸ガスインキュベータが必要なくなるし、弱い細胞も培養しやすくなって便利ですね。」

	「そうなんだが、HanksベースのMEMは、リン酸バッファーと重曹バッファーの２重緩衝系を基本としているので、細胞が培地中のリン酸を消費しない限りはｐＨの変動がEarle系に比べて少ないので良いのだが、細胞が活発に増殖し、リン酸が細胞により代謝されると、比較的早く緩衝能力が減少するという欠点をもっている。したがって増殖の早い細胞では、培地交換を頻繁におこなう必要があるんだ。」

「そうなんだが、HanksベースのMEMは、リン酸バッファーと重曹バッファーの２重緩衝系を基本としているので、細胞が培地中のリン酸を消費しない限りはｐＨの変動がEarle系に比べて少ないので良いのだが、細胞が活発に増殖し、リン酸が細胞により代謝されると、比較的早く緩衝能力が減少するという欠点をもっている。したがって増殖の早い細胞では、培地交換を頻繁におこなう必要があるんだ。」

「そうなんですか。」

	「あと、Hanksベースの培地を使用するときは、炭酸ガスインキュベータで使用しないこと。これはL-15培地にも言えることだが、これら大気中で平衡となるバッファー系を使用する際は注意しないと、培地がすぐ黄色くなるよ。どうしても炭酸ガスインキュベータで使用しなくてはいけないのであれば密栓系で行うことだね。」

「あと、Hanksベースの培地を使用するときは、炭酸ガスインキュベータで使用しないこと。これはL-15培地にも言えることだが、これら大気中で平衡となるバッファー系を使用する際は注意しないと、培地がすぐ黄色くなるよ。どうしても炭酸ガスインキュベータで使用しなくてはいけないのであれば密栓系で行うことだね。」

皆さんも、細胞の状態に応じてEarleとHanksを使い分けてうまく細胞を培養してくださいね。

この講座ではバイ博士に対するみなさまからの質問も受け付けております。
みなさまも陽助手と一緒に学び、培養のプロになりましょう。

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